Преодоление проблем экспрессии и очистки RhoGDI с помощью семейства «параллельных» экспрессионных векторов
Overcoming expression and purification problems of RhoGDI using a family of "parallel" expression vectors
Аннотация
Мы описываем конструирование экспрессионных векторов на основе трех наиболее часто используемых аффинитетных меток для создания генных融合: глутатион-S-трансферазы (GST), мальтозосвязывающего белка (MBP) и пептида His6. Полилинкеры векторов pGEX4T1, pMal-c2 и одного из векторов pET были заменены полилинкером, выделенным из экспрессионной плазмиды бакуловируса pFastBac. После введения в ген соответствующих сайтов рестрикции его можно без значительных дополнительных усилий соединить с каждой из трех аффинитетных меток, что позволяет эффективно проводить скрининг экспрессии. Мы обсуждаем разработку и применение этих векторов для решения проблем очистки, возникших при работе с ингибитором диссоциации нуклеотидов RhoA GDP/GTP (RhoGDI), а также их преимущества по сравнению с доступными на рынке экспрессионными векторами.
Переведем эту статью за 1 час
Загрузите PDF, а мы сделаем полный перевод, краткий конспект и красивую инфографику.
Попробовать бесплатно →Также в Подтеме: еженедельные литобзоры, база международных клинреков и конспекты свежих мед. статей и подкастов каждый день.