Гидродинамическая трансфекция животных путем системного введения плазмидной ДНК

Разработка методов, обеспечивающих эффективную экспрессию экзогенных генов у животных, позволит изучать функции генов, лечить заболевания и получать генные продукты. Мы разработали гидродинамический метод экспрессии трансгенов у мышей путем системного введения плазмидной ДНК. Используя кДНК люциферазы и β-галактозидазы в качестве репортерных генов, мы показали, что эффективный перенос и экспрессии генов можно добиться быстрым введением животным большого объёма раствора ДНК через хвостовую вену. Среди органов, в которых экспрессировался трансген, наиболее высокий уровень экспрессии наблюдался в печени. Однократное введение мыши 5 мкг плазмидной ДНК через хвостовую вену обеспечивало содержание до 45 мкг белка люциферазы на грамм ткани печени. Гистохимический анализ с использованием гена β-галактозидазы в качестве репортера показал, что трансген экспрессируется примерно в 40% гепатоцитов. Согласно временной динамике, экспрессия трансгена в печени достигала максимума примерно через 8 ч после введения, а затем снижалась. Повторное введение плазмидной ДНК позволяло восстановить пиковый уровень экспрессии. Полученные результаты показывают, что разработан простой, удобный и эффективный метод, который можно использовать для изучения функций и регуляции генов, молекулярной патофизиологии с помощью переноса генов, а также для получения белков у животных.