Мультиплексная ПЦР для выявления генов устойчивости к тетрациклину

Для амплификации методом ПЦР 14 генов устойчивости к тетрациклину, часто встречающихся у грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, были подобраны специфические пары праймеров. Для выявления отдельных групп генов tet пары праймеров комбинировали в реакциях мультиплексной ПЦР: группа I — tet(B), tet(C), tet(D); группа II — tet(A), tet(E), tet(G); группа III — tet(K), tet(L), tet(M), tet(O), tet(S); группа IV — tetA(P), tet(Q), tet(X). Для проверки мультиплексной ПЦР праймеры групп I и II использовали при исследовании 25 клинических изолятов Salmonella enterica серовара Typhimurium DT104. Праймеры группы III применили для исследования 19 клинических изолятов метициллин-резистентного золотистого стафилококка. При анализе большого числа штаммов мультиплексная ПЦР должна существенно снизить трудозатраты и стоимость по сравнению с отдельной ПЦР для каждого гена. Этот метод также может быть полезен для дифференциации типов устойчивости к тетрациклину и применяться как дополнительный маркер при расследовании вспышек и эпидемиологическом надзоре.