Ускорение реакции петлевой изотермической амплификации с помощью петлевых праймеров

Петлевая изотермическая амплификация (LAMP) — новый метод амплификации нуклеиновых кислот, позволяющий быстро и эффективно амплифицировать ДНК с высокой специфичностью в изотермических условиях. Для этого используют четыре специально сконструированных праймера и ДНК-полимеразу, обладающую активностью вытеснения цепи. Мы разработали метод ускорения реакции LAMP за счёт дополнительных праймеров, названных петлевыми. Петлевые праймеры связываются с петлями стебель-петля, за исключением тех, с которыми гибридизуются внутренние праймеры, и инициируют синтез ДНК с вытеснением цепи. И внутренние, и петлевые праймеры взаимодействуют с петлями, но используют разные механизмы. В представленном методе LAMP петлевые праймеры позволяют сократить время реакции до менее половины времени, необходимого для исходного метода. Поскольку полный анализ, включая детекцию, занимает менее часа, этот новый метод может облегчить генетические исследования, в том числе генетическую диагностику в клинической лаборатории.