Прижизненная визуализация развития сосудистой системы эмбриона у трансгенных рыбок данио-рерио

В этой работе описана модель, позволяющая непрерывно наблюдать прижизненно за развитием сосудистой системы эмбриона позвоночных. Показано, что промотор fli1 обеспечивает экспрессию усиленного зелёного флуоресцентного белка (EGFP) во всех кровеносных сосудах на протяжении всего эмбриогенеза рыбки данио-рерио. Сочетание трансгенных рыбок с сосудистоспецифичной экспрессией EGFP и мультифотонной лазерной сканирующей микроскопии с покадровой регистрацией позволяет непосредственно наблюдать ангиогенез в головном мозге развивающихся эмбрионов. Полученные изображения показали, что активно растущие сосуды образуют множество филоподий и направляют свой рост подобно конусам роста нейронов. На примере мутанта mindbomb также показано, что экспрессия EGFP в развивающихся сосудах позволяет подробно анализировать сосудистые дефекты, связанные с генетическими мутациями. Таким образом, эти трансгенные линии позволяют детально изучать сосудистую систему эмбрионов дикого типа и мутантов. В сочетании с возможностью проводить крупномасштабный прямой генетический скрининг у рыбки данио-рерио они помогут выявлять новые мутации, влияющие на развитие сосудов.