Применение новой адгезивной пленки для получения универсальных свежезамороженных срезов твердых тканей, целых животных, насекомых и растений

Описан метод получения тонких свежезамороженных срезов крупных образцов и твердых тканей, а также показаны области его применения. Для изготовления срезов предложена новая адгезивная пленка. Образец замораживают в охлажденном гексане или жидком азоте, а затем заключают в 4–5% карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ), охлажденную до температуры хладагента. К поверхности среза прикрепляют специально подготовленную адгезивную пленку, которая поддерживает ткань во время медленного разрезания одноразовым лезвием из карбида вольфрама. Перед использованием пленку изготавливают из тонкого пластика и клеевого слоя. Метод позволяет получать свежезамороженные срезы толщиной 2 мкм из крупных образцов, костей и зубов. «Пленочные срезы» — то есть срезы, прикрепленные к адгезивной пленке, — можно использовать для различных исследований: гистологии, общей гистохимии, гистохимии ферментов, иммуногистохимии, гибридизации in situ, элементного анализа и авторадиографии водорастворимых веществ. Иммуногистохимическое исследование и гибридизацию in situ можно проводить на нефикированных недекальцинированных срезах. Прикрепленный к пленке срез можно перенести на предметное стекло, накрыть покровным стеклом и изучать при большом увеличении с помощью светового микроскопа. Метод также подходит для получения замороженных срезов образцов рыб, насекомых и растений. Кроме того, с отдельных участков пленочного среза можно собирать материал методом лазерной микродиссекции. Широкий спектр применений адгезивной пленки делает ее полезной для биологических и медико-стоматологических исследований.