ПЦР-диагностика и характеристика Leishmania в местных и импортированных клинических образцах

В регионах, где циркулирует несколько видов возбудителя, диагностика лейшманиоза должна позволять непосредственно определять вид в клиническом образце, без культивирования паразита. Чувствительность двух ПЦР-подходов, амплифицирующих фрагмент гена ssu рРНК и внутренний транскрибируемый спейсер рибосомной ДНК (ITS), соответственно, оценивали на образцах крови человека и собак, в которые вносили промастиготы Leishmania. ПЦР по ssu-рДНК была чувствительнее, чем ПЦР по ITS1, однако этот подход не позволял определить вид. При использовании вложенной ПЦР по ITS1 её чувствительность сравнялась с таковой у ПЦР по ssu-рДНК. Расщепление ампликона ITS1 рестриктазой HaeIII позволило различать все медицински значимые виды Leishmania. ПЦР по ITS1 применяли для диагностики 162 местных и завозных подозрительных случаев лейшманиоза в Израиле, Палестинской автономии и Германии. ПЦР оказалась положительной в 113 случаях (69,7%), а идентификация вида была возможна в 110 образцах. ДНК Leishmania также амплифицировали и определяли на уровне вида из архивных неокрашенных и окрашенных по Гимзе микроскопических препаратов.