Мультиплексные анализы на основе микросфер для выявления растворимых цитокинов: сравнение чувствительности и количественных показателей тест-систем разных производителей

Введение: Мультиплексные анализы на основе микросфер позволяют одновременно количественно определять несколько цитокинов в растворе методом проточной цитометрии, используя их связывание с микросферами, различающимися по спектральным характеристикам. Поскольку несколько производителей предлагают реагенты для количественного определения одних и тех же цитокинов на одном приборе, необходимо сравнить, дают ли эти тест-системы сходные результаты и сопоставимы ли они с результатами иммуноферментного анализа (ИФА).

Методы: Сравнение тест-систем для определения цитокинов проводили с использованием прибора Luminex 100. В 26 образцах сыворотки крови, полученных от 7 участников, определяли интерферон-γ, интерлейкины 1β, 6 и 8, а также фактор некроза опухоли-α с помощью мультиплексных тест-систем компаний LINCO Research, Bio-Rad Laboratories, R&D Systems и BioSource International. Каждый анализ выполняли согласно инструкциям производителя. Калибровочные кривые строили с использованием референсных концентраций, предоставленных каждым производителем. ИФА для определения интерлейкина-8 выполняли с помощью тест-систем R&D и BioSource.

Результаты: Уровни цитокинов демонстрировали сходную динамику, хотя абсолютные концентрации, полученные с помощью разных тест-систем, различались. Результаты ИФА и Luminex для интерлейкина-8 были сходными при использовании тест-систем одного производителя.

Выводы: Поскольку относительные измерения концентрации цитокинов часто имеют значение при серийных исследованиях, для межлабораторных сравнений, вероятно, можно использовать разные тест-системы. Если принципиально важны абсолютные значения, следует применять тест-системы одного производителя. Результаты, полученные методом анализа на основе микросфер и ИФА, в пределах одного производителя, по-видимому, сопоставимы.