Новый автоматизированный колориметрический метод измерения общего окислительного статуса

Цель: Разработать новый автоматизированный колориметрический метод измерения общего окислительного статуса (TOS).

Методы: Метод основан на окислении ионов двухвалентного железа до трёхвалентного железа под действием различных окислителей в кислой среде и определении образовавшихся ионов трёхвалентного железа с помощью ксиленолового оранжевого. Реакцию окисления усилили, а выпадение белков в осадок предотвратили. Кроме того, при хранении реагента предотвращалось автоокисление содержащихся в нём ионов двухвалентного железа. Метод адаптировали для автоматического анализатора, калиброванного по перекиси водорода, и определили его аналитические характеристики.

Результаты: Выявлены тесные корреляции с растворами перекиси водорода, трет-бутилгидропероксида и кумилгидропероксида (для всех r=0,99; p<0,001). Кроме того, новый метод продемонстрировал типичную сигмоидальную кривую реакции при индуцированном медью автоокислении липопротеинов. Метод линеен до 200 мкмоль H2O2-экв./л, а его прецизионность составляет менее 3%. Нижний предел обнаружения — 1,13 мкмоль H2O2-экв./л. Реагенты сохраняют стабильность в автоматическом анализаторе не менее 6 месяцев. Концентрация общего окислительного статуса в сыворотке была значительно выше у пациентов с остеоартрозом (21,23±3,11 мкмоль H2O2-экв./л), чем у здоровых лиц (14,19±3,16 мкмоль H2O2-экв./л; p<0,001); также выявлена значимая отрицательная корреляция с общей антиоксидантной способностью (TAC) (r=−0,66; p<0,01).

Выводы: Описанный простой, стабильный, надёжный, чувствительный, недорогой и полностью автоматизированный метод можно применять для измерения общего окислительного статуса.