Молекулярная структура и свойства лектина плодов томата

КДНК, кодирующую лектин плодов томата, клонировали из библиотеки кДНК незрелых плодов томата черри. Выделенная кДНК лектина содержала открытую рамку считывания, кодирующую белок из 365 аминокислот; последовательности входивших в него пептидов были определены. Согласно выведенной аминокислотной последовательности, белок состоит из трёх отдельных доменов: (i) короткого N-концевого экстензиноподобного домена; (ii) богатого цистеином домена связывания углеводов, включающего четыре почти идентичных хитинсвязывающих домена; (iii) внутреннего экстензиноподобного домена длиной 101 аминокислота с 15 мотивами SerPro(4), расположенного между первым и вторым хитинсвязывающими доменами. По данным масс-спектрометрии с матричной лазерной десорбцией/ионизацией и времяпролётным анализатором (MALDI-TOF MS), молекулярная масса лектина составляла 65 633 Да, а дегликозилированного лектина — 32 948 Да. Эти значения соответствовали расчётной молекулярной массе, полученной по выведенной аминокислотной последовательности. Рекомбинантный лектин томата, экспрессированный в Pichia pastoris, связывал хитин, но не обладал гемагглютинирующей активностью. Полученные данные подтвердили, что клонированная кДНК кодирует лектин томата.