Определение анаболических стероидов в моче крупного рогатого скота методом жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией

Разработан мультианалитный метод на основе жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ЖХ-МС/МС) для определения 15 анаболических стероидов в моче крупного рогатого скота: диэтилстильбэстрола, диенэстрола, гексэстрола, β-эстрадиола, этинилэстрадиола, α-/β-болденона, α-нортестостерона, α-/β-зераленола, α-/β-зераланола, зеараленона, станозолола и 16β-гидроксистаноzolола. Процедура включала ферментативный гидролиз, экстракцию метил-трет-бутиловым эфиром, промывку гексаном и заключительную очистку методом твердофазной экстракции на картриджах Oasis HLB и Amino. Количественное определение аналитов проводили методом жидкостной хроматографии в сочетании с тандемным масс-спектрометром LC-TSQ Quantum AM, работавшим в режимах положительной и отрицательной химической ионизации при атмосферном давлении (APCI). Данные регистрировали в режиме мониторинга множественных реакций (MRM), количественно определяя два диагностических иона-продукта для выбранного иона-предшественника. Метод валидировали в соответствии с Решением Комиссии 2002/657/EC, устанавливающим требования к обнаружению и подтверждению остатков в продуктах животного происхождения. Оценивали специфичность, чувствительность, правильность и прецизионность метода. Пределы принятия решения CCα составляли 0,06–0,26 нг/мл, а возможности обнаружения CCβ — 0,11–0,49 нг/мл. Разработанный метод обладает высокой чувствительностью и пригоден для обнаружения, количественного определения и подтверждения наличия этих анаболических стероидов в моче крупного рогатого скота; его можно применять в программах контроля остатков.