Надёжная методика исследования микроРНК мочи как опухолевого маркера: микроРНК-126 и микроРНК-182 связаны с раком мочевого пузыря

Цель: Показано, что микроРНК связаны с ростом определённых типов злокачественных клеток. При уротелиальном раке мочевого пузыря (РМП) особенно необходимы новые неинвазивные методы диагностики; моча представляет собой легко доступный источник молекулярных маркеров, включая РНК. Поэтому целью исследования была разработка клинически применимого и чувствительного протокола выделения и молекулярного анализа низкомолекулярной РНК из образцов мочи пациентов с РМП и здоровых добровольцев.

Материалы и методы: Сначала разработали метод выделения низкомолекулярной РНК из образцов мочи представителей четырёх групп: (1) пациентов с РМП низкой степени злокачественности, (2) пациентов с РМП высокой степени злокачественности, (3) пациентов с инфекциями мочевых путей и (4) здоровых доноров; в каждой группе n = 9. Затем в полученных экстрактах РНК с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией анализировали 157 видов микроРНК. После этого микроРНК, содержание которых в образцах мочи пациентов с РМП было выше, исследовали в независимой выборке образцов мочи (n = 47).

Результаты: Диагностическая значимость и практическая применимость методики подтверждены тем, что соотношение микроРНК-126 и микроРНК-152 позволяло выявлять РМП по образцам мочи со специфичностью 82% и чувствительностью 72%; площадь под ROC-кривой составила 0,768 (95% доверительный интервал 0,605–0,931).

Выводы: Описана новая надёжная и практичная технологическая платформа для анализа малых РНК в образцах мочи, включая новые опухолевые маркеры на основе РНК. Подробный технический анализ методики позволил получить новые сведения о характеристиках микроРНК мочи, в частности об их составе и вариабельности, зависящей от донора.