Оценка выделения островков у человека и крупных животных

Последние достижения в выделении островков из поджелудочной железы крупных млекопитающих, включая человека, подчеркнули необходимость разработки точных и воспроизводимых методов оценки выхода островков. В настоящей работе обсуждаются количественные и качественные критерии оценки выделения островков; основное внимание уделено определению их числа, объёма, чистоты, морфологической сохранности, а также исследованию функции конечных препаратов островков in vitro и in vivo. Рекомендуется использовать дитизон в качестве специфического красителя для немедленного выявления ткани островков, что позволяет оценить общее число островков, распределив их по классам с шагом 50 мкм по диаметру, и чистоту конечного препарата. Надлежащая морфологическая оценка должна включать подтверждение идентификации островков, оценку сохранности их структуры и чистоты препарата. Для оценки жизнеспособности предложено совместное использование флуоресцентных красителей, позволяющих одновременно количественно определить долю неповреждённых и повреждённых клеток. Перфузия островков раствором глюкозы позволяет получить динамический профиль стимулированного глюкозой высвобождения инсулина и оценить способность клеток снижать его секрецию после прекращения гликемической стимуляции. Хотя данные перфузии служат полезным ориентиром для оценки жизнеспособности островков, количество и кинетика высвобождения инсулина не обязательно предсказывают функциональность островков после имплантации. Поэтому окончательным критерием жизнеспособности островков является их функция после трансплантации диабетическому реципиенту. По этой причине предложены модели трансплантации аликвоты конечного препарата островков диабетическим бестимусным (атимическим) грызунам. Мы надеемся, что эти общие рекомендации помогут стандартизировать оценку выделения островков, что позволит точнее интерпретировать и сопоставлять методики, применяемые в разных центрах.