Определение стадии эстрального цикла у мышей с помощью влагалищного смыва, окрашивания кристаллическим фиолетовым и цитологического исследования

Быстрый способ оценки репродуктивного статуса грызунов полезен не только при изучении нарушений репродуктивной функции, но и необходим для создания новых моделей заболеваний у мышей и исследования гормональной регуляции дегенерации (или регенерации) тканей после патологического воздействия. Репродуктивный, или эстральный, цикл мышей подразделяется на 4 стадии: проэструс, эструс, метэструс и диэструс. Переход между этими стадиями сопровождается закономерными колебаниями концентраций циркулирующих стероидных гормонов яичников — 17β-эстрадиола и прогестерона, гонадотропинов — лютеинизирующего и фолликулостимулирующего гормонов, а также лютеотропного гормона пролактина. Изменения клеточного состава влагалищного канала мышей отражают эти эндокринные процессы. Ежедневная оценка относительного соотношения ядерных эпителиальных клеток, ороговевших плоских эпителиальных клеток и лейкоцитов во влагалищных мазках позволяет определить стадию эстрального цикла у мышей. Однако инвазивность метода забора образцов может изменить репродуктивный статус и вызвать воспалительную реакцию, что затрудняет цитологическую оценку мазков. В настоящей работе описан простой неинвазивный протокол определения стадии эстрального цикла у самки мыши без нарушения ее репродуктивного цикла. Подробно изложены методы различения четырех стадий эстрального цикла путем забора и анализа преобладающих типов клеток во влагалищных мазках, а также интерпретации этих изменений с учетом эндокринного статуса.