Влияние заряда наночастиц хондроитинсульфата и хитозана, содержащих FITC-BSA, на их поглощение клетками монослоя Caco-2 человека

Введение и методы: Были получены и охарактеризованы наночастицы хондроитинсульфата и хитозана, а также положительно и отрицательно заряженные наночастицы на их основе с альбумином бычьей сыворотки, конъюгированным с изотиоцианатом флуоресцеина (FITC-BSA). В клетках линии Caco-2 — аденокарциномы эпителия толстой кишки человека — оценивали свойства наночастиц, включая их поглощение клетками, цитотоксичность и трансэпителиальный транспорт, а также изучали их с помощью сканирующей электронной микроскопии с полевой эмиссией, просвечивающей электронной микроскопии и конфокальной лазерной сканирующей микроскопии. Методом ионной геляции были получены наночастицы со средним размером 250 нм и дзета-потенциалом от −30 до +18 мВ.

Результаты: Стандартные тесты жизнеспособности клеток показали, что при инкубации с наночастицами хондроитинсульфата и хитозана, в том числе содержащими FITC-BSA, жизнеспособность клеток сохранялась на уровне выше 95% при концентрации частиц до 0,1 мг/мл. Эндоцитоз наночастиц подтверждён конфокальной лазерной сканирующей микроскопией и количественно оценён методом проточной цитометрии. Исследования трансэпителиального транспорта ex vivo с использованием клеток Caco-2 показали, что наночастицы эффективно проникают в эти клетки путём эндоцитоза. Поглощение положительно заряженных наночастиц с FITC-BSA через эпителиальный слой было эффективнее, чем поглощение отрицательно заряженных частиц.

Выводы: Полученные в исследовании наночастицы хондроитинсульфата и хитозана эффективно поглощались клетками Caco-2 путём эндоцитоза и не вызывали значительной цитотоксичности даже при высокой концентрации. Такие наночастицы могут стать новой системой доставки гидрофильных макромолекул.