Сульфорафан подавляет связывание ЛПС с комплексом TLR4/MD2 за счёт преимущественного связывания с Cys133 белка MD2

Толл-подобные рецепторы (TLR) — ключевые рецепторы распознавания образцов, выявляющие патогены и эндогенные молекулы немикробного происхождения и запускающие врождённый и адаптивный иммунный ответ. Поскольку активация TLR играет существенную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний, сепсиса, метаболических заболеваний и рака, регуляция активности TLR считается одним из наиболее важных терапевтических подходов. Липополисахарид (ЛПС) — эндотоксин грамотрицательных бактерий и хорошо известный агонист TLR4, вызывающий воспаление и септический шок. ЛПС взаимодействует с TLR4 посредством связывания с гидрофобным карманом белка миелоидного дифференцировочного фактора 2 (MD2), корецептора TLR4. В этом исследовании показано, что сульфорафан (SFN) нарушает связывание ЛПС с MD2, что было установлено in vitro и подтверждено коиммунопреципитацией MD2 и ЛПС в клеточной системе. Ингибирующее действие SFN на взаимодействие ЛПС и MD2 устранялось при добавлении тиолсодержащих соединений N-ацетил-L-цистеина или дитиотреитола, что свидетельствует о зависимости этого эффекта от способности SFN модифицировать тиольные группы. Действительно, анализ методом micro LC-MS/MS показал, что SFN преимущественно образует аддукты с Cys133 в гидрофобном кармане MD2, но не с Cys95 и Cys105. Согласно результатам молекулярного моделирования, связывание SFN с Cys133 блокирует связывание ЛПС и липида IVa с гидрофобным карманом MD2. Полученные результаты свидетельствуют, что SFN нарушает связывание ЛПС с комплексом TLR4/MD2 посредством прямого связывания с Cys133 белка MD2. Эти данные указывают на новый механизм противовоспалительного действия SFN и предлагают новую мишень для регуляции воспалительных и иммунных реакций, опосредованных TLR4, с помощью фитохимических соединений.