Выживание и жизнеспособность некультивируемых Escherichia coli и Vibrio cholerae в эстуарной и морской среде

Методы посева, используемые для оценки выживания бактерий-индикаторов, таких как Escherichia coli, и возбудителей инфекций, передающихся через воду, включая Vibrio cholerae, имеют существенные ограничения при оценке жизнеспособных популяций этих микроорганизмов в водной среде. Сочетание иммунофлуоресцентной микроскопии, прямого подсчёта после окрашивания акридиновым оранжевым и прямого подсчёта жизнеспособных клеток с культуральными методами, такими как косвенный подсчёт по методу наиболее вероятного числа (MPN) и прямой высев, показало, что E. coli и V. cholerae переходят в «невосстанавливаемое» состояние, но сохраняют жизнеспособность. После 2-недельной инкубации в микрокосмах с солёной водой (5–25‰ NaCl) общее число клеток, определённое методом прямой микроскопии после окрашивания флуоресцентными антителами и акридиновым оранжевым, не изменилось, тогда как оценки MPN и результаты посевов быстро снижались. Прямой подсчёт жизнеспособных клеток — метод, позволяющий оценивать жизнеспособные клетки, реагирующие на субстрат, с помощью микроскопического исследования, — показал, что значительная доля некультивируемых клеток действительно сохраняет жизнеспособность. Таким образом, представления о выживании возбудителей в водной среде необходимо пересмотреть. Концепция «отмирания» или «деградации» может быть не вполне справедливой. Кроме того, с учётом полученных результатов возможность использования индексов колиформных и фекальных колиформных бактерий для оценки качества воды в целях охраны здоровья населения может быть существенно ограничена.