Влияние добавок к питательной среде на профиль гликозилирования IgG, продуцируемого клетками яичника китайского хомячка в биореакторах с подпиткой

Терапевтические моноклональные антитела (mAb) преимущественно получают посредством гетерологичной экспрессии в клетках яичника китайского хомячка (CHO). Профиль гликозилирования mAb существенно влияет на эффективность и безопасность лекарственного препарата и поэтому является важным параметром, который необходимо контролировать в процессе производства. В этом исследовании изучали влияние добавления к культурам клеток CHO восьми предшественников гликозилирования на N-гликозилирование IgG. Исследование проводили в режиме подпитки в биореакторах с биологическими репликами, что обеспечивало высокую степень контроля и сопоставимость условий. Оценивали неоднородность IgG по заряду и характер гликозилирования. Ни одна из восьми добавок не вызвала статистически значимых изменений роста клеток или продуктивности по IgG по сравнению с контролем. Однако добавление галактозы в концентрации 20 мМ приводило к воспроизводимому увеличению доли галактозилированного IgG с 14 до 25%. Напротив, добавление 20 мМ N-ацетил-D-глюкозамина (GlcNAc) снижало относительную долю галактозилированного IgG на 4%. Кроме того, добавление 10 мМ маннозы незначительно снижало степень присоединения GlcNAc к IgG. В целом сопоставление влияния добавления предшественников гликозилирования в культуральную среду на гликозилирование IgG показало возможность использовать эти соединения для управления N-гликозилированием IgG в процессе культивирования.