Макрофаги M1 и M2, полученные из клеток THP-1, по-разному модулируют ответ опухолевых клеток на этопозид

Введение: Макрофаги, ассоциированные с опухолью (TAM), в высокой плотности присутствуют в солидных опухолях. TAM во многом сходны с альтернативно активированными макрофагами, также называемыми M2. Показано, что они способствуют развитию опухоли, и предполагается их роль в химиорезистентности. В настоящем исследовании изучали влияние макрофагов M2 по сравнению с M1 на чувствительность опухолевых клеток к этопозиду.

Методы: Модель поляризации макрофагов создавали из моноцитов THP-1, дифференцированных в макрофаги с помощью PMA (форбол-12-миристат-13-ацетата). После дифференцировки (макрофаги M0) клетки инкубировали с IL-4 и IL-13 для получения поляризованных макрофагов M2 или с IFN-гамма и LPS для классической активации макрофагов (M1). Чтобы смоделировать взаимодействие между опухолевыми клетками и TAM, макрофаги M0, M1 или M2 и опухолевые клетки HepG2 или A549 совместно культивировали в течение соответственно 16 часов (HepG2) или 24 часов (A549) до воздействия этопозида в течение 24 часов (HepG2) или 16 часов (A549). После инкубации изучали влияние этопозида на поляризацию макрофагов, а апоптоз опухолевых клеток оценивали по вестерн-блоту на фрагментированные белки каспазы-3 и PARP-1, по анализу активности каспаз и по проточной цитометрии с окраской Annexin V и PI.

Результаты: Экспрессия мРНК и белков маркеров M1 и M2 подтвердила поляризацию макрофагов, полученных из THP-1, что представляет собой новую, простую и хорошо охарактеризованную модель поляризованных макрофагов человека. Этопозид-индуцированный апоптоз опухолевых клеток заметно снижался в присутствии макрофагов THP-1 M2, тогда как в клетках, совместно культивированных с макрофагами M1, апоптоз, напротив, возрастал. С другой стороны, этопозид не влиял на поляризацию M1 или M2.

Выводы: Эти результаты впервые демонстрируют отчетливый защитный эффект макрофагов M2 в отношении этопозид-индуцированного апоптоза опухолевых клеток, в отличие от макрофагов M1.