Транскрипционные факторы, связанные с хондрогенезом, в плеоморфной аденоме слюнной железы: механизм формирования мезенхимной ткани

При плеоморфной аденоме слюнной железы экспрессия компонентов внеклеточного матрикса (ВКМ) указывает на приобретение опухолевыми эпителиальными клетками хондрогенного фенотипа и их способность продуцировать хрящеподобную мезенхимную ткань. Sox9 — ключевой транскрипционный фактор хондрогенеза — экспрессируется в клетках слюнной железы мыши. Для выяснения механизма хондрогенеза в опухолевых эпителиальных клетках мы исследовали экспрессию транскрипционных факторов, связанных с хондрогенезом, в опухолях и слюнных железах. В тканях плеоморфной аденомы, слюнных желез и клетках HSG (клетках человеческой подчелюстной слюнной железы) выполняли полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), количественную ОТ-ПЦР в реальном времени и иммуногистохимическое окрашивание. мРНК основных транскрипционных факторов хондрогенеза — Sox9, Sox6 и Sox5 — выявляли как в опухолевых тканях, так и в тканях слюнных желез. мРНК аггрекана и коллагена II типа — хрящеспецифических компонентов ВКМ — обнаруживали только в опухолях. Белки Sox9 и Sox6 совместно локализовались во многих эпителиальных клетках опухолей и слюнных желез. В опухолевых эпителиальных клетках также выявляли белок аггрекана, а иногда и белок коллагена II типа. Кроме того, мРНК транскрипционных репрессоров хондрогенеза δEF1 и AP-2α обнаруживали как в опухолях, так и в слюнных железах, тогда как мРНК Twist1 выявляли только в слюнных железах; в опухолях её уровень был значительно снижен либо находился ниже порога обнаружения. Белок Twist1 локализовался в клетках слюнной железы, экспрессирующих Sox9. Клетки HSG экспрессировали Sox9, Sox6 и Twist1, но не аггрекан и коллаген II типа, поэтому были сходны с клетками слюнной железы. Подавление Twist1 с помощью siRNA против Twist1 приводило к повышению экспрессии мРНК аггрекана и коллагена II типа в клетках HSG. Напротив, принудительная экспрессия Twist1 при введении кДНК Twist1 приводила к снижению экспрессии обоих генов. В совокупности эти результаты показывают, что клетки слюнной железы обладают потенциалом к хондрогенезу, а снижение экспрессии Twist1, сопровождающее неопластическую трансформацию, позволяет опухолевым эпителиальным клеткам продуцировать хрящеподобную мезенхимную ткань при плеоморфной аденоме слюнной железы.