Механическое выделение стромально-васкулярной фракции — обоснованная и практичная альтернатива обработке коллагеназой: сравнительное исследование

Введение: Стромально-васкулярную фракцию и стромальные клетки жировой ткани всё чаще изучают в контексте регенерации тканей. Показано, что стромальные клетки жировой ткани способны к дифференцировке и обладают иммуномодулирующими свойствами. Одна из основных задач в области клеточной терапии — разработать быстрый, недорогой и не требующий ферментов метод получения стромально-васкулярной фракции, обогащённой стромальными клетками жировой ткани. Авторы сравнили новые механические методы с золотым стандартом — обработкой коллагеназой.

Методы: Стромально-васкулярную фракцию получали из материала 21 липосакции с помощью ферментативной обработки или одного из двух механических методов: интенсивного перемешивания с центрифугированием либо разделения с помощью последовательной обработки между шприцами. Оценивали влияние обработки ткани на количество и жизнеспособность клеток, их пролиферацию, клоногенное обогащение и фенотипы различных клеток исходного материала. Также сравнивали фенотипы стромальных клеток жировой ткани, полученных разными методами, и их способность к дифференцировке и иммуносупрессивный потенциал.

Результаты: При ферментативной обработке выделяли больше жизнеспособных клеток, чем при разделении между шприцами и интенсивном перемешивании с центрифугированием. Темп размножения и клоногенное обогащение были выше в стромально-васкулярной фракции, полученной с помощью коллагеназы. Доля стромальных клеток жировой ткани была выше во фракции, полученной разделением между шприцами, чем во фракциях после ферментативной обработки и интенсивного перемешивания с центрифугированием (p < 0,01). При этом все культивированные стромальные клетки жировой ткани обладали сходной способностью к дифференцировке и иммуносупрессивными свойствами.

Выводы: Ферментативная обработка позволяет выделить больше стромальных клеток жировой ткани, однако разделение между шприцами обеспечивает быстрое получение стромально-васкулярной фракции, обогащённой этими клетками. Механические методы позволяют выделять стромальные клетки жировой ткани, сохраняющие свойства стволовых клеток и иммуносупрессивные свойства, сопоставимые с таковыми после ферментативной обработки. Эти методы могут упростить и ускорить получение обогащённой стромально-васкулярной фракции для практического применения.

Клинический вопрос/уровень доказательности: терапевтическое исследование, уровень V.