Противоопухолевая активность и свойства новых гемоцианинов в качестве носителей при конъюгации с мимотопом ганглиозида GD2

Конъюгация с белками-носителями позволяет повысить иммуногенность пептидов. Это особенно важно при разработке противоопухолевых вакцин на основе пептидов, имитирующих углеводные опухолеассоциированные антигены. Наиболее часто для этой цели используют гемоцианин морского блюдечка (KLH) из Megathura crenulata. Его ограниченная доступность стимулировала поиск новых кандидатов; однако неизвестно, насколько другие гемоцианины эффективны в качестве носителей углеводных пептидных мимотопов для индукции противоопухолевого ответа. В настоящем исследовании оценивали свойства в качестве носителей и противоопухолевую активность новых гемоцианинов с подтверждённой иммуногенностью, полученных из Concholepas concholepas (CCH) и Fissurella latimarginata (FLH). Гемоцианины конъюгировали с P10 — пептидом, имитирующим GD2, основной ганглиозид нейроэктодермальных опухолей, — с помощью sulfo-SMCC; в качестве адъюванта использовали AddaVax. Исследование гуморального иммунного ответа у мышей показало, что конъюгаты CCH-P10 и FLH-P10 индуцировали специфические антитела классов IgM и IgG к мимотопу P10, сопоставимые с антителами, полученными при введении KLH-P10, использованного в качестве положительного контроля. Антисыворотки к CCH-P10 и FLH-P10, как и антисыворотки к CCH и FLH, перекрёстно реагировали с клетками меланомы мыши и человека, что указывает на перекрёстную реакцию гликозилированных структур CCH и FLH с углеводными эпитопами на поверхности опухолевых клеток, аналогичную реакции антисывороток к KLH. После иммунизации мышей каждым из конъюгатов гемоцианина с P10 и последующего введения клеток меланомы более выраженный противоопухолевый эффект наблюдали для FLH-P10, чем для CCH-P10 и KLH-P10, независимо от наличия конъюгации. Полученные данные показывают, что CCH и FLH могут служить носителями углеводных мимотопов; однако наиболее выраженная противоопухолевая активность препаратов FLH указывает на перспективность этого гемоцианина для дальнейших исследований противоопухолевых вакцин.