Условия, регулирующие пролиферацию кроветворных стволовых клеток in vitro

Описана система жидкой культуры, в которой пролиферация кроветворных стволовых клеток (CFU-S), образование клеток-предшественников гранулоцитов (CFU-C) и выраженный гранулопоэз могут поддерживаться in vitro в течение нескольких месяцев. Такие культуры состоят из адгезивной и неадгезивной клеточных популяций. Адгезивная популяция содержит фагоцитирующие мононуклеарные клетки, «эпителиальные» клетки и «гигантские жировые» клетки. Последние, по-видимому, особенно важны для поддержания стволовых клеток; кроме того, созревающие гранулоциты имеют выраженную тенденцию к избирательному скоплению в области скоплений «гигантских жировых» клеток и вокруг них. При «подкармливании» культур с недельными интервалами регулярно происходило от 10 до 15 «удвоений клеточной популяции» функционально нормальных CFU-S. При подкармливании дважды в неделю число «удвоений клеточной популяции» могло увеличиваться. Первоначально в культурах наблюдался выраженный гранулопоэз, за которым в большинстве случаев следовало накопление бластных клеток. В конечном итоге количество и бластных клеток, и гранулоцитов уменьшалось, и в культурах преобладали фагоцитирующие мононуклеарные клетки. Культивирование при температуре 33 °C приводило к более интенсивному росту адгезивных клеток; в таких культурах лучше сохранялись стволовые клетки и увеличивалась плотность клеток. При исследовании активности, стимулирующей образование колоний (CSA), культуры неизменно давали отрицательный результат. Добавление экзогенной CSA вызывало быстрое уменьшение числа стволовых клеток, снижение гранулопоэза и накопление фагоцитирующих мононуклеарных клеток.