Первое сообщение о выявлении зерновой цистообразующей нематоды Heterodera latipons на пшенице в Марокко

С мая по июнь 2011 года при обследовании районов выращивания пшеницы в Мекнесе, в регионе Саис (Марокко), были обнаружены несколько популяций цистообразующих нематод. Пробы отбирали за месяц до уборки пшеницы (Triticum durum) на полях с участками угнетённых растений. Растения плохо росли, нижние листья были хлоротичными, а число колосьев — сниженным. Корневая система была укороченной и густо разветвлённой из-за усиленного образования боковых корней. На корнях цист не обнаружили, но они присутствовали в почве. Цисты выделяли из почвы на ситах с ячейками 200 мкм методом декантации и просеивания по модифицированному методу Кобба (1), а затем идентифицировали по морфологическим признакам и результатам секвенирования внутреннего транскрибируемого спейсера рДНК (ITS). Все изоляты, кроме полученного в Айн-Джемаа, были идентифицированы как Heterodera avenae. Для изолята из Айн-Джемаа определили основные морфологические характеристики цист и личинок второй стадии (J2). Цисты (n = 10) имели следующие характеристики: двухоконный вульвальный конус, длина тела без шеи — 590 мкм (551–632 мкм), ширина тела — 393 мкм (310–490 мкм), длина шеи — 75 мкм (65–90 мкм), длина фенестры — 64 мкм (60–72 мкм), ширина фенестры — 21 мкм (18–25 мкм), длина подмостика — 96 мкм (85–115 мкм), длина вульвальной щели — 8 мкм (7–9 мкм), ширина вульвального мостика — 27 мкм (24–33 мкм); буллы отсутствовали. J2 (n = 10) имели следующие характеристики: длина тела — 445 мкм (412–472 мкм), ширина тела — 19 мкм (19–21 мкм), длина стилета — 24 мкм (23–25 мкм), четыре латеральные линии, длина хвоста — 50 мкм (46–54 мкм), длина гиалиновой части хвоста — 28 мкм (24–31 мкм). Значения морфологических характеристик соответствовали диапазонам, описанным для H. latipons у Handoo (3). Для H. latipons типичны двухоконные цисты с выраженным подмостиком и без булл, а также J2 с длиной хвоста более 40 мкм, длиной стилета более 15 мкм и четырьмя линиями в латеральном поле. Для подтверждения идентификации провели молекулярный анализ. ДНК отдельно выделили из трёх личинок, взятых из трёх разных цист (4). Область ITS-рДНК амплифицировали с помощью праймеров 5'-CGT AAC AAG GTA GCT GTA G-3' и 5'-TCC TCC GCT AAA TGA TAT G-3' согласно описанию Ferris et al. (2). В результате был получен фрагмент ДНК длиной 1040 п. н. Продукты ПЦР очистили и секвенировали (Macrogen, Inc., Сеул, Республика Корея). Все полученные последовательности (номера доступа GenBank для каждой цисты: JQ319035, JQ319036 и JQ319037) сравнили с последовательностями из базы данных GenBank (www.ncbi.nlm.nih.gov), в том числе с последовательностями нескольких видов Heterodera. Сходство последовательностей с H. latipons составило 97–99%, а с любым другим видом Heterodera — не более 89%. Морфологическая и молекулярная идентификация показала, что популяция цистообразующих нематод с пшеничного поля в Айн-Джемаа (Марокко) относится к виду H. latipons. На участках с угнетёнными растениями обнаружили 65 цист на 100 см³ почвы. Насколько нам известно, это первое сообщение о выявлении H. latipons. Поскольку эта нематода может причинять значительный ущерб пшенице — одной из основных зерновых культур Марокко, необходимо предотвращать её распространение в другие регионы. Литература: (1) K. R. Barker. С. 19 в: An Advanced Treatise on Meloidogyne. Т. II. Methodology. C. C. Carter и J. N. Sasser, ред. North Carolina State University Graphics, Raleigh, 1985. (2) V. R. Ferris et al. Fundam. Appl. Nematol. 16:177, 1993. (3) Z. A. Handoo. J. Nematol. 34:250, 2002. (4) M. Holterman et al. Mol. Biol. Evol. 23:1792, 2006.3