Инфузионная терапия аденозином, лидокаином и Mg2+ обеспечивает 72-часовую выживаемость после геморрагического шока: модель для изучения дифференциальной экспрессии генов и продления биологического времени

Введение: Кровотечение из неприжимаемых ран туловища — одна из ведущих причин смерти при травмах. Цель исследования — оценить продолжительность выживания и экспрессию ключевых генов-регуляторов клеточного метаболизма после введения болюса 3% раствора NaCl с аденозином, лидокаином и магнием (ALM), а затем 4-часовой инфузии 0,9% раствора NaCl с ALM в модели неконтролируемого геморрагического шока у крыс.

Методы: Крыс-самцов линии Sprague-Dawley массой 425 ± 8 г анестезировали и случайным образом распределили в группу контроля (физиологический раствор; n = 10) или группу терапии ALM (n = 10). Кровотечение вызывали резекцией печени (60% левой латеральной доли). Через 15 минут внутривенно вводили однократный болюс 3% раствора NaCl ± ALM (0,7 мл/кг; этап 1), а через 60 минут начинали 4-часовую инфузию 0,9% раствора NaCl ± ALM для стабилизации состояния (0,5 мл/кг в час; этап 2); наблюдение продолжалось 72 часа. Измеряли среднее артериальное давление и концентрацию лактата. Через 72 часа или при достижении высокого балла тяжести состояния ткани быстро замораживали зажимным методом и хранили при −80 °C. Из сердца, мозга и печени выделяли общую РНК и определяли относительную экспрессию генов amp-k, mtCO3, PGC-1α и sirt-1.

Результаты: По кривым выживаемости Каплана—Майера средняя продолжительность выживания составила 22,6 ± 4,5 часа в контрольной группе и 72 ± 0 часа в группе ALM (p < 0,05). Смерть контрольных животных сопровождалась примерно семикратным повышением концентрации лактата, тогда как у животных, получавших ALM, она оставалась близкой к исходной в течение 72 часов. Относительная экспрессия amp-k, PGC-1α и sirt-1 в сердце и мозге была выше в группе ALM, чем в контрольной группе: в 1,5 и 2,7 раза соответственно (p < 0,05). Исключением стал псевдоген 1 митохондриально-кодируемой цитохром-c-оксидазы III в сердце: его экспрессия была выше в 19 раз. Напротив, экспрессия amp-k, sirt-1 и mtCO3 в печени в группе ALM была значимо ниже, чем в контрольной группе, на 29–41%, а экспрессия PGC-1α — на 75%.

Выводы: Терапия ALM в малом объёме увеличила продолжительность выживания после геморрагического шока в 3,3 раза по сравнению с контрольной группой, получавшей физиологический раствор. Характерной особенностью фенотипа выживания при терапии ALM было повышение экспрессии amp-k, PGC-1α, sirt-1 и mtCO3 в сердце и мозге, предположительно усиливающее функцию митохондрий и продукцию АТФ, при одновременном снижении экспрессии этих генов в печени. Эти различия экспрессии генов между центральными и периферическими органами требуют дальнейшего изучения.