Новый метод высушивания биологических образцов для сканирующей электронной микроскопии: сублимационная сушка с трет-бутиловым спиртом

Разработан простой метод высушивания биологических материалов для сканирующей электронной микроскопии. Фиксированные образцы после обезвоживания в восходящем ряду концентраций этанола погружали в трет-бутиловый спирт. Если температура в помещении была ниже точки плавления трет-бутилового спирта (25,5 °C), использовали спирт, предварительно расплавленный нагреванием. Затем образцы в спирте замораживали в холодильнике. Их помещали под колпак вакуумного испарителя и откачивали воздух ротационным насосом. После сублимации замороженного спирта в вакууме образцы полностью высыхали в течение 1 ч. При исследовании методом сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) поверхностные и внутриклеточные структуры были видны в трех измерениях, без существенных артефактов высушивания. Тщательное сравнение показало, что изображения СЭМ, полученные этим методом, были не хуже, а в ряде случаев лучше изображений после сушки в критической точке.