Алкогольдегидрогеназа 5 Helicoverpa armigera взаимодействует с промотором CYP6B6 в ответ на воздействие 2-тридеканона

Алкогольдегидрогеназа 5 (ADH5) относится к семейству дегидрогеназ/редуктаз средней длины цепи и участвует в метаболизме клеточного формальдегида и S-нитрозоглутатиона. 2-тридеканон (2-TD) — токсичное соединение, присутствующее у многих культур семейства паслёновых и защищающее их от различных насекомых-фитофагов. В контексте развития насекомых и стратегий борьбы с вредителями в настоящем исследовании изучали, как новая форма ADH5 Helicoverpa armigera (HaADH5) регулирует экспрессию CYP6B6 — гена, участвующего в линьке и метаморфозе, — в ответ на воздействие 2-TD. Клонирование комплементарной ДНК HaADH5 показало, что её открытая рамка считывания длиной 1002 п. н. кодирует белок из 334 аминокислот с расчётной молекулярной массой 36,5 кДа. Белок HaADH5 очищали с использованием прокариотической системы экспрессии в клетках штамма Escherichia coli Transetta (pET32a-HaADH5). Способность белка HaADH5 взаимодействовать с чувствительным к 2-TD участком промотора CYP6B6 подтверждена методом электрофоретического анализа с задержкой подвижности и в ходе валидации транскрипционной активности в дрожжах. Наконец, через 48 ч после скармливания искусственного корма с 2-TD в концентрации 10 мг/г в средней кишке личинок шестого возраста выявлено значимое снижение уровней экспрессии HaADH5 и CYP6B6. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при воздействии 2-TD на хлопковую совку HaADH5 регулирует экспрессию CYP6B6, взаимодействуя с его промотором. Поскольку регуляция экспрессии CYP6B6 посредством HaADH5 может участвовать в детоксикации ксенобиотиков у личинок, линьке и метаморфозе, HaADH5 представляет собой потенциальную мишень для контроля роста и развития хлопковой совки.