Питательные среды по требованию: непрерывное приготовление химически определённой среды непосредственно из сухих компонентов

Химически определённые питательные среды обычно готовят порциями и хранят в накопительных ёмкостях до использования. Чтобы отказаться от крупных накопительных ёмкостей и порционного приготовления сред, мы разработали систему непрерывного приготовления по требованию непосредственно из сухих компонентов. Система состоит из бункера и шнекового конвейера, способного подавать сухую порошкообразную среду с требуемой точностью ±5% при низкой скорости дозирования — 0,171 г/мин. Коммерчески доступную сухую порошкообразную среду для культивирования клеток непрерывно подавали в течение 12 ч в смеситель, соединённый с УФ-ячейкой для мониторинга, после чего полученную среду сравнивали со средой, приготовленной порционно. Профили аминокислот, углеводов и осмоляльности при обоих способах приготовления были сопоставимы. При культивировании двух клеточных линий CHO, продуцирующих антитела адалимумаб и трастузумаб, на малом и настольном масштабах эффективность порционного и непрерывного приготовления сред также была сопоставимой. Углублённый анализ полученных антител показал одинаковый профиль гликозилирования, а также сопоставимые характеристики других посттрансляционных модификаций, включая окисление метионина и дезамидирование. Таким образом, непрерывное приготовление среды обеспечивает такое же качество продукта. Непрерывное приготовление сред по требованию изменит цепочку поставок и существенно сократит площадь производственных помещений, необходимую для приготовления и хранения. -1