Выделение внеклеточных везикул с использованием комбинированных методов обогащения

Внеклеточные везикулы в настоящее время вызывают большой интерес во многих научных областях и обладают потенциалом для разработки диагностических методов и средств терапии на их основе. Большинство наиболее известных отдельных методов выделения внеклеточных везикул имеют определённые преимущества и недостатки с точки зрения чистоты препарата и выхода везикул. Комбинирование методов выделения может дополнительно повысить чистоту и выход. В настоящем обзоре оценены вклад и эффективность комбинированного применения методов выделения внеклеточных везикул на основании двухэтапного систематического анализа литературы, включавшего все публикации 2019 года, в которых применяли такие методы. В результате был составлен обзор различных методов выделения. Затем была создана вторая база данных, включавшая все исследования из первой базы, в которых корректно сравнивали несколько методов выделения, определяя после процедуры как чистоту препарата, так и выход везикул. Анализ этих баз данных показал, что наиболее часто используемые методы выделения не обязательно являются лучшими с точки зрения чистоты или выхода, что указывает на влияние и других факторов, помимо эффективности метода, на его выбор. Среди включённых исследований около 60% процедур выделения выполняли с использованием комбинированных методов. В большинстве случаев применяли только дифференциальное ультрацентрифугирование или его сочетание с дифференциальной ультрафильтрацией. При оценке эффективности методов по чистоте препарата и выходу комбинированные методы явно превосходили отдельные независимо от типа исходного материала. В качестве отправной точки рекомендуется использовать эксклюзионную хроматографию, поскольку этот метод, особенно в сочетании с низкоскоростным центрифугированием, обеспечивал наивысшую чистоту при сохранении приемлемого выхода везикул.