Включение негидролизованных сульфатированных долгоживущих метаболитов анаболических стероидов в скрининг допинговых веществ методом газовой хроматографии с квадрупольно-времяпролётной масс-спектрометрией

Всемирное антидопинговое агентство (WADA) ежегодно публикует список запрещённых веществ и устанавливает минимальные требуемые рабочие характеристики для каждого из них. Для соблюдения этих строгих требований антидопинговые лаборатории используют как минимум два взаимодополняющих метода первичного тестирования: один на основе газовой хроматографии — масс-спектрометрии (GC-MS), другой — жидкостной хроматографии — масс-спектрометрии (LC-MS). В последние годы анаболические андрогенные стероиды (AAS) неизменно оставались наиболее часто выявляемым классом соединений. За последнее десятилетие появились данные о том, что более длительный период выявления достигается при анализе сульфатированных метаболитов AAS, а не традиционных глюкуронидных конъюгатов. Несмотря на десятилетние исследования сульфатированных метаболитов AAS методом LC-MS, процедура первичного тестирования методом LC-MS, объединяющая этот класс соединений с другими обязательными целевыми соединениями, не разработана. Такое объединение необходимо по экономическим соображениям. Недавно было показано, что прямое введение негидролизованных сульфатов совместимо с GC-MS. В настоящей работе впервые описана валидированная процедура первичного тестирования, которая благодаря этому подходу и полноценному использованию возможностей открытого скрининга с помощью квадрупольно-времяпролётной масс-спектрометрии (QTOF-MS) позволяет выявлять негидролизованные сульфатированные метаболиты AAS и одновременно сохраняет способность обнаруживать широкий спектр соединений других классов, а также количественно определять эндогенные стероиды, что необходимо для соответствия процедуры первичного тестирования действующим нормативам WADA. Метод включает 263 соединения из 9 категорий, в том числе стимуляторы, наркотические средства, анаболические андрогенные стероиды и β-адреноблокаторы. Дополнительные преимущества нового метода продемонстрированы при анализе экскреционных образцов дростанолона, местеролона и метенолона. Негативного влияния на традиционные маркеры не выявлено, а период выявления местеролона и метенолона увеличился по сравнению с традиционными маркерами соответственно до 150% и 144%.