Депигментирующее действие птеростильбена in vitro и in vivo посредством индукции аутофагии в меланоцитах и подавления продукции α-MSH в кератиноцитах после облучения УФА через антиоксидантные пути, опосредованные Nrf2

Птеростильбен (Pt) — природный полифенол, содержащийся в чернике и нескольких сортах винограда. Его фармакологические свойства хорошо изучены. Однако депигментирующее действие птеростильбена ранее не было продемонстрировано. Мы оценили депигментирующее действие Pt посредством индукции аутофагии в клетках B16F10 и подавления продукции α-MSH в кератиноцитах HaCaT после облучения УФА (3 Дж/см) через антиоксидантные пути, опосредованные Nrf2. Pt в концентрации 2,5–5 мкМ снижал продукцию активных форм кислорода и подавлял активность пути POMC/α-MSH в клетках HaCaT. Кондиционированная среда, полученная от клеток HaCaT, предварительно обработанных Pt и подвергнутых облучению УФА, подавляла меланогенез в клетках B16F10 за счёт снижения активности пути MITF–CREB–тирозиназа. Интересно, что индукция аутофагии в клетках HaCaT под действием Pt проявлялась усиленным накоплением LC3-II, активацией p62/SQSTM1 и образованием AVO. В клетках HaCaT, подвергнутых воздействию меланина, полученного из клеток B16F10, Pt значительно снижал содержание меланосомного gp100, но повышал уровень LC3-II. Pt активировал и усиливал антиоксидантный путь Nrf2 в клетках HaCaT, что приводило к повышению экспрессии антиоксидантных белков HO-1, γ-GCLC и NQO-1. Активация Nrf2 опосредовалась путями ERK, AMPK и активных форм кислорода. Однако подавление экспрессии Nrf2 снижало антиоксидантное действие Pt, приводя к неконтролируемому повышению уровней активных форм кислорода и α-MSH после облучения УФА, что указывает на ключевую роль пути Nrf2. Кроме того, в стимулированных α-MSH клетках B16F10 Pt в концентрации 10–30 мкМ снижал экспрессию MC1R, MITF, тирозиназы, TRP-1/TRP-2 и меланина. Pt также оказывал выраженное антимеланогенное действие посредством индукции аутофагии в клетках B16F10, что подтверждалось повышением уровней LC3-II и p62, образованием AVO и увеличением соотношения Beclin-1/Bcl-2, а также снижением уровня ATG4B и активности пути PI3K/AKT/mTOR. Трансмиссионная электронная микроскопия непосредственно продемонстрировала, что после обработки Pt аутофагосомы поглощают меланосомы в стимулированных α-MSH клетках B16F10. Кроме того, антимеланогенное действие Pt, обусловленное подавлением экспрессии TRP-1/TRP-2 и тирозиназы, образованием меланосом и синтезом меланина через путь CREB–MITF, существенно ослаблялось после предварительной обработки 3-MA — ингибитором аутофагии — или подавления экспрессии LC3 в клетках B16F10. Результаты исследования in vivo также подтвердили, что Pt подавляет экспрессию и активность тирозиназы, а также эндогенную пигментацию в модели рыбок данио-рерио. Таким образом, птеростильбен обладает выраженным отбеливающим и антиоксидантным действием и может применяться в составе средств для местного осветления кожи.