Валидация автоматизированного иммуноанализа LUMIPULSE для определения основных биомаркеров болезни Альцгеймера в спинномозговой жидкости

Цель: Основные биомаркеры болезни Альцгеймера в спинномозговой жидкости (СМЖ) — общий тау-белок (tTau), фосфорилированный тау-белок (pTau), амилоид β 1–42 (Aβ 1–42) и соотношение Aβ 1–42/Aβ 1–40 — преобразили исследования болезни Альцгеймера и сегодня всё чаще используются в клинических лабораториях в качестве диагностических инструментов. Полностью автоматизированные анализаторы иммуноанализа с готовыми к применению наборами реагентов и калибраторами упростили их определение и повысили воспроизводимость результатов. Мы оценили аналитические характеристики полностью автоматизированного иммуноанализатора LUMIPULSE G (Fujirebio) для определения четырёх основных биомаркеров болезни Альцгеймера в СМЖ и установили диагностические пороговые значения.

Методы: Результаты исследований на анализаторе LUMIPULSE G сравнивали с результатами валидированных ИФА INNOTEST (Fujirebio) для hTau Ag, pTau 181 и β-амилоида 1–42, с результатами V-PLEX Plus Aβ Peptide Panel 1 (6E10) (Meso Scale Discovery) для соотношения Aβ 1–42/Aβ 1–40, а также с результатами референсного метода жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией для Aβ 1–42. Для всех анализов оценивали воспроизводимость внутри лаборатории и между лабораториями. Диагностические пороговые значения для Aβ 1–42, tTau и pTau определяли при анализе трёх когорт пациентов с клинически установленным диагнозом, включавших 651 образец СМЖ. Для соотношения Aβ 1–42/Aβ 1–40 пороговое значение определяли методом анализа смеси распределений на основании 2782 образцов СМЖ.

Результаты: Результаты исследований на анализаторе LUMIPULSE G имели сильную корреляцию с результатами всех других иммуноанализов (r > 0,93 для всех анализов). Коэффициенты вариации при повторяемости (внутри лаборатории) составляли 2,0–5,6%; наибольшая вариабельность наблюдалась для β-амилоида 1–40. Коэффициенты вариации при воспроизводимости (между лабораториями) составляли 2,1–6,5%; наибольшая вариабельность наблюдалась для β-амилоида 1–42. Диагностические пороговые значения для болезни Альцгеймера составили 409 нг/л для общего тау-белка, 50,2 нг/л для pTau 181, 526 нг/л для β-амилоида 1–42 и 0,072 для соотношения Aβ 1–42/Aβ 1–40.

Выводы: Полученные результаты свидетельствуют о том, что анализы биомаркеров болезни Альцгеймера в СМЖ на анализаторе LUMIPULSE G пригодны для применения в клинической лабораторной практике. Кроме того, они подтверждают ранее опубликованные референсные пределы для этих биомаркеров.