Мониторинг ответа на ПУВА-терапию непосредственно в клетках с помощью платформы поверхностно-усиленной рамановской спектроскопии на чипе с массивом ячеек

Терапия псораленом и ультрафиолетом A (ПУВА-терапия) зарекомендовала себя как перспективный метод лечения псориаза. Однако избыточная дозировка ПУВА-терапии может вызывать побочные эффекты, например развитие меланомы, которые часто остаются без внимания во время лечения. Поэтому для минимизации побочных эффектов важно непосредственно отслеживать ответ на ПУВА-терапию. Известно, что аномальная экспрессия тирозиназы (TYR) связана с меланомой, что делает этот фермент потенциальной мишенью для оценки ответа на ПУВА-терапию. В настоящей работе представлена стратегия мониторинга активности TYR во время ПУВА-терапии непосредственно в клетках с помощью платформы поверхностно-усиленной рамановской спектроскопии (SERS) на чипе с массивом ячеек. Чип с массивом ячеек моделировал условия среды для культивирования клеток. В изолированных микрокамерах удалось захватывать отдельные клетки и анализировать живые клетки. Для оценки активности TYR в живых клетках во время ПУВА-терапии использовали субстрат с фермент-индуцированной самосборкой структуры «ядро—оболочка». Ядром служили наночастицы золота, модифицированные молекулой-репортёром SERS — 4-меркаптобензонитрилом (4-MBN). В присутствии кислорода и TYR происходило гидроксилирование L-тирозина, вследствие чего на поверхности золотых ядер восстанавливались ионы серебра. Рост серебряных оболочек сопровождался усилением сигнала молекулы-репортёра, непосредственно связанным с активностью TYR. Предел обнаружения активности TYR составил 0,45 Ед/мл. После ПУВА-терапии удалось выявить повышение активности TYR. Мониторинг ПУВА-терапии с помощью платформы SERS на чипе с массивом ячеек позволяет получать данные об ответе на лечение в реальном времени и непосредственно в клетках; такой подход может быть полезен для клинического применения ПУВА-терапии.