Ориентированная иммобилизация антител на сенсорных платформах: критический обзор

Иммуносенсоры зарекомендовали себя как универсальный инструмент для выявления различных аналитов, включая пищевые загрязнители, патогенные бактерии, антибиотики и биомаркеры, связанные с раком. Для создания стабильных и воспроизводимых иммуносенсоров с высокой чувствительностью ковалентная иммобилизация иммуноглобулинов (IgG) с заданной ориентацией обеспечивает более высокую эффективность. В отличие от случайной ориентации IgG, возникающей при прямой, но неселективной иммобилизации, в этом обзоре впервые представлены достижения в области пошаговых сайт-специфичных стратегий конъюгации, повышающих эффективность биосенсоров. Сначала IgG нековалентно адсорбируют, что обеспечивает специфическое взаимодействие с Fc-фрагментом, после чего последующая ковалентная конъюгация необратимо фиксирует однородную ориентацию, благоприятную для связывания антигенов. В обзоре пошаговые стратегии разделены на две группы в зависимости от типа нековалентного взаимодействия: взаимодействие с гомофункциональной подложкой, опосредованное адгезивным слоем, и взаимодействие без промежуточного слоя с гетерофункциональной подложкой, поверхность которой содержит несколько различных функциональных групп, способных взаимодействовать с IgG. Кроме того, рассмотрено влияние характеристик лигандов на гетерофункциональную подложку, включая стратегии синтеза, требования к спейсерам и выбор матриц. В заключение обсуждаются перспективы практического применения пошаговой ковалентной конъюгации. Обзор содержит дополнительные сведения о создании высокоэффективных иммуносенсоров; особое внимание уделено правильной ориентации полноразмерных IgG на сенсорной платформе.