Масштабируемый серологический подход к профилированию гуморального иммунного ответа при инфекции SARS-CoV-2 и вакцинации

Цель: Тестирование антител к SARS-CoV-2 сыграло важную роль в выявлении перенесённого контакта с вирусом и анализе иммунного ответа, индуцированного вакцинацией. Мы описываем масштабируемый подход для выявления и количественной оценки антител к SARS-CoV-2, различения ответов, вызванных естественной инфекцией и вакцинацией, а также оценки опосредованного антителами ингибирования взаимодействия шиповидного белка с ангиотензинпревращающим ферментом 2 (ACE2).

Методы: Разработаны методы и реагенты для выявления антител к SARS-CoV-2 с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Основные тесты предназначены для параллельного выявления иммуноглобулинов класса G (IgG) к тримеру шиповидного белка, его рецептор-связывающему домену (RBD) и нуклеокапсиду (N). Суррогатный нейтрализационный ИФА (snELISA), измеряющий опосредованное антителами ингибирование взаимодействия ACE2 с шиповидным белком или RBD, был автоматизирован. Тесты откалиброваны по референсному стандарту Всемирной организации здравоохранения.

Результаты: Одноточечные ИФА на основе IgG позволили точно различать неинфицированных и инфицированных лиц. При оценке серопревалентности в невакцинированной когорте наибольшую специфичность обеспечивала классификация образца как положительного при выявлении антител как минимум к 2 из 3 антигенов. В вакцинированных когортах наблюдалось повышение уровня антител к шиповидному белку и RBD, но не к N. Представлены подробные протоколы анализа сыворотки, плазмы и высушенных пятен крови, выполняемого вручную и на автоматизированных платформах. snELISA можно выполнять автоматически в одноточечном формате, что повышает его масштабируемость.

Выводы: Высокопроизводительное измерение антител к трём вирусным антигенам и выявление нейтрализующих антител, способных нарушать взаимодействие шиповидного белка с ACE2, позволяют проводить крупномасштабный анализ гуморального иммунного ответа при инфекции SARS-CoV-2 и вакцинации. Реагенты доступны для масштабирования стандартизированных серологических тестов, что позволяет сопоставлять и объединять данные разных лабораторий.