Критический анализ технологии рекомбиназно-полимеразной амплификации

Введение: Рекомбиназно-полимеразная амплификация (RPA) — перспективная технология быстрого амплифицирования нуклеиновых кислот-мишеней из минимально обработанных образцов с помощью небольших портативных устройств. RPA подходит для тестирования по месту оказания медицинской помощи и полевого тестирования, а также совместима с микрофлюидными устройствами. Разработано несколько методов детекции, однако химические основы RPA и её кинетика изучены недостаточно, а многие недостатки технологии остаются нерешёнными.

Рассматриваемые вопросы: В этом обзоре подробно описаны молекулярный механизм RPA, форматы наборов, оптимизация, области применения, преимущества и недостатки метода. Особое внимание уделено проблеме неспецифичности RPA, её последствиям и необходимости дальнейших исследований для её устранения. Рассмотрена кинетика реакции RPA в зависимости от длины мишени, количества продукта и чувствительности. Кроме того, авторы критически оценивают новизну амплификации с помощью рекомбиназы (RAA). В обзоре обсуждаются многие ранее не освещавшиеся аспекты технологии RPA, представлены более глубокий анализ и новые взгляды на неё.

Мнение эксперта: RPA — отличный выбор для выявления возбудителей, особенно в условиях ограниченных ресурсов. При условии устранения недостатков метода и повышения доступности реагентов RPA потенциально может заменить ПЦР во всех областях применения.