Возвращение перманганата калия в качестве красителя основных белков на ультратонких срезах для просвечивающей электронной микроскопии

Раствор перманганата калия применяли как фиксатор и краситель для ультратонких срезов при просвечивающей электронной микроскопии благодаря его способности обеспечивать хороший контраст различных компонентов ткани. Позднее от него отказались из-за таких недостатков, как выраженное образование осадка и хрупкость обработанных этим красителем срезов под электронным пучком. Мы показываем, что наблюдаемая зернистость срезов связана не с образованием неспецифического осадка, а с интенсивным окрашиванием основных белков, например белков хроматина, тесно связанных с ДНК, и рибосомных частиц. Благодаря этому хорошо контрастируются ядра, особенно участки гетерохроматина, гранулярный компонент ядрышек и шероховатая эндоплазматическая сеть, богатые этими белковыми комплексами. Мы также показываем, что заливка в акриловую смолу LR White позволяет сохранить хорошую морфологию; такие срезы менее чувствительны к обработке перманганатом калия, чем срезы, залитые эпоксидной смолой, и пригодны для иммуноцитохимических исследований. Хрупкость срезов, залитых эпоксидной смолой, можно частично уменьшить, используя сетки, покрытые формваром.