Разработка методики окрашивания гематоксилином и эозином, иммуногистохимического исследования и EBER-ISH после обработки трихлоризоциануровой кислотой тканей, содержащих меланин

В исследовании оценивали влияние трихлоризоциануровой кислоты (TCCA) на обесцвечивание и морфологию патологических срезов, содержащих меланин. Срезы тканей 27 пациентов с высоким содержанием меланина обесцвечивали 0,5% перманганатом калия, 10% перекисью водорода и растворами TCCA различных концентраций. Выявлены значимые различия между группой контроля без обработки и группой, получавшей 1% TCCA (P < 0,0001). Оценка окраски гематоксилином и эозином (ГЭ) после обработки 1% TCCA с последующим восстановлением pH была сопоставима с оценкой при стандартной окраске ГЭ (P > 0,05). Сравнили диагностические оценки морфологии 50 патологических срезов с различным содержанием меланина до и после обесцвечивания 1% TCCA. В группах со средним и высоким содержанием меланина диагностические оценки до и после обработки значимо различались (P < 0,05). Иммуногистохимическое окрашивание проводили на ткани меланомы мозговых оболочек. Для удаления меланина после иммуногистохимического окрашивания Ki67, S100 и β-catenin использовали 8% раствор TCCA. После обесцвечивания TCCA окрашивание и локализация каждого маркера, независимо от его локализации, оставались точными, а фон был чистым. Аналогичные результаты получены при EBER-ISH. Авторы пришли к выводу, что 1% TCCA можно использовать для окрашивания ГЭ патологических срезов, содержащих меланин, а после удаления меланина TCCA — применять схему окрашивания ГЭ с восстановлением pH. Для обесцвечивания после иммуногистохимического окрашивания DAB использовали 8% TCCA. Меланин удавалось удалить полностью, и срезы сохраняли диагностическую пригодность.