Трёхкомпонентные составы элюента улучшают профилирование терапевтических пептидов методом сверхкритической флюидной хроматографии

В настоящее время опубликовано мало данных о применении трёхкомпонентных составов элюента для разделения пептидов методом сверхкритической флюидной хроматографии. В настоящей работе изучены преимущества добавления ацетонитрила к метанолу в качестве модификатора. В качестве модельных веществ выбраны три циклических пептида-антибиотика: бацитрацин, колистин и даптамицин с молекулярной массой от 1000 до 2000 Да. Оптимизирован состав трёхкомпонентной смеси диоксида углерода, метанола и ацетонитрила для повышения разрешения при получении характеристического профиля пептидов. Кроме того, было установлено, что изменение соотношения метанола и ацетонитрила меняет порядок элюирования аналитов, что представляет собой ценный инструмент при разработке методики. Для каждого пептида оптимизирован индивидуальный градиентный метод с использованием двух колонок Torus 2-PIC (каждая размером 100 × 3,0 мм, размер частиц 1,7 мкм), диоксида углерода и модификатора, состоящего из ацетонитрила, метанола, воды и метансульфоновой кислоты (60:40:2:0,1, об.:об.:об.:об.). На основании полученных результатов предложен универсальный протокол разработки методик, применимый к полипептидам.