Разработка и синтез новых N-концевых пептидов интегрина и аминопептидазы как нового подхода к противоопухолевой терапии

Короткие пептиды, содержащие аминокислотные последовательности аспарагин–глицин–аргинин (NGR) и аргинин–глицин–аспарагиновая кислота (RGD), обладают высокой связывающей способностью с рецептором аминопептидазы N (APN/CD13) и белками интегрина, экспрессия которых повышена при опухолевом росте. Были разработаны и синтезированы новые модифицированные N-концевые гексапептиды P1 и P2 с использованием твердофазного пептидного синтеза по протоколу Fmoc-химии. По данным МТТ-теста, при низких концентрациях пептидов сохранялась жизнеспособность нормальных и опухолевых клеток. Оба пептида проявляли выраженную противоопухолевую активность в отношении четырёх опухолевых клеточных линий и нормальных клеток: Hep-2, HepG2, MCF-7, A375 и Vero; полученные результаты сопоставляли с действием стандартных препаратов доксорубицина и паклитаксела. Кроме того, методом компьютерного моделирования прогнозировали сайты связывания и ориентацию пептидов относительно потенциальных противоопухолевых мишеней. Измерения стационарной флуоресценции показали, что пептид P1 преимущественно взаимодействует с анионными бислоями POPC/POPG, а не с цвиттерионными липидными бислоями POPC; пептид P2 не демонстрировал избирательного взаимодействия с липидными бислоями. При этом пептид P2 проявлял противоопухолевую активность, обусловленную мотивом NGR/RGD. По данным кругового дихроизма, при связывании с анионными липидными бислоями вторичная структура пептидов изменялась лишь незначительно.