Везикулы различного размера, полученные методом быстрой экструзии

Предыдущие исследования, проведённые в нашей лаборатории, показали, что крупные однослойные везикулы можно эффективно получать экструзией многослойных везикул через поликарбонатные фильтры с размером пор 100 нм (Hope, M.J., Bally, M.B., Webb, G. and Cullis, P.R. (1985) Biochim. Biophys. Acta 812, 55–65). В настоящей работе показано, что аналогичные процедуры позволяют получать однослойные или многослойные везикулы однородного размера при использовании фильтров с размером пор от 30 до 400 нм. Однослойность и эффективность захвата содержимого этими везикулами можно значительно повысить предварительным замораживанием и размораживанием многослойных везикул перед экструзией. Этот метод особенно применим при очень высокой концентрации липидов (400 мг/мл): при экструзии замороженных и размороженных многослойных везикул через фильтры с размером пор 100 и 400 нм эффективность захвата составила соответственно 56 и 80%. Электронная микроскопия методом замораживания — скалывания показала, что везикулы, полученные при таких концентрациях липидов, характеризуются распределением по размерам и степенью многослойности, сопоставимыми с показателями систем, полученных при более низких концентрациях липидов. Эти результаты указывают на то, что сочетание замораживания — размораживания и экструзии является методом выбора для получения везикул различного размера с высокой эффективностью захвата содержимого.