Выделение и концентрирование болденона и его основного метаболита из образцов мочи для последующего определения соотношения 13C/12C методом газовой хроматографии/сжигания/масс-спектрометрии изотопных отношений

Газовая хроматография/сжигание/масс-спектрометрия изотопных отношений (GC/C/IRMS) позволяет выявлять синтетические формы эндогенных анаболических андрогенных стероидов, сравнивая соотношения 13C/12C в эндогенном референтном и целевом соединениях. Выделение и концентрирование целевого соединения из матрицы мочи — необходимое условие подтверждения методом GC/C/IRMS при допинг-контроле. Болденон (Bo) — природный анаболический андрогенный стероид (AAS), производное тестостерона. Подтверждение наличия Bo и его основного метаболита 5β-андрост-1-ен-17β-ол-3-она (BoM) методом GC/C/IRMS крайне затруднено из-за низких концентраций этих соединений и чрезвычайно сложного состава мочи. В настоящем исследовании описан способ очистки образцов для анализа методом GC/C/IRMS с использованием двумерной ВЭЖХ в режиме онлайн. Bo и BoM удалось выделить и сконцентрировать из образцов мочи при концентрациях всего 2 нг/мл, обеспечив высокую чистоту и селективность. Соответствие метода требованиям подтверждено согласно техническому документу Всемирного антидопингового агентства. Очистка методом двумерной ВЭЖХ в режиме онлайн обеспечивала высокую селективность в отношении аналитов и не приводила к изотопному фракционированию при сборе фракций. Метод может применяться в качестве рутинного для подтверждения наличия болденона в лабораториях допинг-контроля.