Полный химический синтез склонных к агрегации пептидов морской звезды, богатых дисульфидными связями

Гонадостимулирующий пептид, подобный релаксину (RGP), Aso-RGP, содержащий шесть остатков цистеина, был выявлен у морской звезды «терновый венец» (COTS, Acanthaster cf. solaris) и первоначально получен методом рекомбинантной экспрессии в дрожжах. В результате образовывался одноцепочечный пептид с неотщеплённым C-пептидом (гистидиновой меткой) и недостаточной чистотой. Целью настоящей работы был химический синтез Aso-RGP в зрелой форме, состоящей из двух цепей (A и B) и содержащей три дисульфидные связи, без C-пептида. Кроме того, планировалось синтезировать ранее не полученный пептид Aso-RLP2, подобный релаксину, также выявленный у морской звезды «терновый венец». В статье представлен первый полный химический синтез Aso-RGP и Aso-RLP2. Синтез Aso-RGP прошёл без существенных затруднений, тогда как синтез A-цепи Aso-RLP2 в восстановленном неструктурированном состоянии с двумя свободными тиольными группами оказался значительно сложнее. Первоначально это проявлялось на хроматограммах ВЭЖХ с обращённой фазой в виде «нечётких» профилей, обычно указывающих на неудачу синтеза. Однако окисление A-цепи значительно улучшило профиль хроматограммы, показав, что основной проблемой была не неудача синтеза, а склонность пептида к агрегации, которая первоначально затрудняла анализ. Это открытие подчёркивает необходимость учитывать агрегацию при синтезе и анализе пептидов. В итоге оба пептида были успешно синтезированы с чистотой более 95%.