Ядерные рецепторы-сироты NR4A1 и NR4A2 регулируют эндотелиально-гемопоэтический переход при формировании гемопоэтических стволовых клеток у мыши

Гемопоэтические стволовые клетки (ГСК) обеспечивают кроветворение на протяжении всей жизни и возникают в середине гестации из гемогенных эндотелиальных предшественников в результате эндотелиально-гемопоэтического перехода (ЭГП). Молекулярные механизмы, регулирующие этот процесс, изучены не полностью. Представители подсемейства рецепторов-сирот NR4A подавляют опухолевый рост при миелоидном лейкозогенезе, однако ранее их роль в формировании ГСК не описывалась. Мы обнаружили, что во время ЭГП в гемогенном эндотелии повышается экспрессия Nr4a1 и Nr4a2. Последовательное снижение дозы генов Nr4a приводило к постепенному уменьшению числа новых гемопоэтических предшественников c-Kit+ в развивающихся эмбрионах и размера скоплений клеток c-Kit+ в дорсальной аорте, а также блокировало созревание ГСК. На это указывали накопление про-ГСК и пре-ГСК типа I и уменьшение числа пре-ГСК типа II. В соответствии с этими наблюдениями клетки, выделенные из комплекса аорта—гонады—мезонефрос эмбрионов на 11,5-й день развития с генотипом Nr4a1-/-; Nr4a2-/-, не обладали способностью к длительному восстановлению кроветворения in vivo. Пространственный транскриптомный анализ показал, что инактивация Nr4a1 и Nr4a2 препятствует подавлению сигнального пути Notch во внутриаортальных скоплениях и тем самым мешает созреванию про-ГСК до ГСК. Этот дефект частично компенсировался при культивировании выделенного комплекса аорта—гонады—мезонефрос ex vivo с фактором стволовых клеток (SCF), интерлейкином-3 (IL-3) и лигандом FLT3 (FLT3L), что может позволить обойти регуляцию, зависимую от Notch. В целом полученные данные указывают на роль рецепторов-сирот семейства NR4A в ЭГП.