Мультиплексный ненаправленный подход позволяет отслеживать метаболический профиль оксиметолона и метастерона in vivo на уровне нанограммов методом GC-Orbitrap-HRMS в целях антидопингового контроля

Оксиметолон и метастерон относятся к анаболическим андрогенным стероидам, запрещённым Всемирным антидопинговым агентством (WADA) как во время соревнований, так и вне их. Выявление метаболитов экзогенных стероидов имеет решающее значение для подтверждения нарушений антидопинговых правил, поэтому исследование этих метаболитов является важной частью антидопингового контроля. В настоящем исследовании с помощью газовой хроматографии с высокоразрешающей масс-спектрометрией на Orbitrap (GC-Orbitrap-HRMS) на уровне нанограммов изучали мочевые метаболические профили оксиметолона и метастерона, используя новый протокол мультиплексного ненаправленного подхода. Каждый из здоровых добровольцев принял одну таблетку препарата; после этого в течение 50 суток собирали образцы мочи. Метаболиты полностью исследовали в трёх фракциях: свободной, глюкуронидной и сульфатной. Для анализа образцов мочи после приёма препарата применяли режим полного сканирования GC-Orbitrap-HRMS и сравнивали полученные данные с исходными образцами мочи, собранными до приёма препарата, чтобы выявить вновь образовавшиеся вещества. На основании масс-спектров электронной ионизации (EI) предполагали возможную структуру метаболитов, что позволило обнаружить три новых метаболита оксиметолона и два новых метаболита метастерона. В частности, новый метаболит оксиметолона 2-метилен-17α-метиландростан-16ξ,17β-диол-3-он (O-M6) выявлялся в виде глюкуронидного конъюгата до 4 суток после приёма препарата. Метаболит метастерона 18-нор-17β-гидроксиметил-2α,17α-диметил-5α-андрост-13-ен-3-он (M-M4) сохранялся в моче значительно дольше: в образцах обоих добровольцев его обнаруживали в виде глюкуронидного конъюгата до 50 суток после приёма препарата. Эти результаты имеют большое значение для антидопингового контроля, поскольку позволяют увеличить сроки выявления данных анаболических стероидов.