Пептид, связанный с геном кальцитонина, регулирует отдельные интерферон-стимулируемые гены, подавляя апоптоз эпителиальных клеток роговицы при заболевании сухого глаза

Цель: Пептид, связанный с геном кальцитонина (CGRP), рассматривается как потенциальное средство для лечения заболевания сухого глаза (ЗСГ), однако механизм его действия изучен недостаточно. Цель исследования — оценить влияние CGRP на апоптоз эпителиальных клеток роговицы в модели ЗСГ.

Методы: Образцы слезы получили у пациентов с ЗСГ, а также у крыс с экспериментальной моделью ЗСГ и из модели клеток эпителия роговицы человека HCET со сверхэкспрессией CGRP. Концентрации CGRP и IFN-γ в слезе определяли методом ИФА и сопоставляли с клиническими данными. Апоптоз эпителиальных клеток роговицы оценивали с помощью иммуноблоттинга, количественной ПЦР с обратной транскрипцией, окрашивания методом TUNEL и проточной цитометрии. Также проводили скрининг методом секвенирования РНК и валидацию белков-мишеней CGRP в эпителиальных клетках роговицы.

Результаты: Уровень CGRP в слезе пациентов с ЗСГ значимо положительно коррелировал с несколькими клиническими показателями заболевания (P < 0,05). Повышение экспрессии CGRP наблюдалось и в животной модели ЗСГ. Экзогенные пептиды CGRP значимо снижали апоптоз тканей роговицы (P < 0,05); аналогичное снижение наблюдалось в группе со сверхэкспрессией CGRP (P < 0,05). Снижение апоптоза тканей роговицы было связано с сигнальным путем IFN-γ/JAK2/STAT1. По данным секвенирования РНК, CGRP(8-37) одновременно усиливал апоптоз, подавлял экспрессию отдельных интерферон-стимулируемых генов (SISGs) и был связан с активацией пути IFN-γ/JAK2/STAT1 (P < 0,05).

Выводы: Высокая концентрация CGRP в слезе пациентов с ЗСГ значимо коррелировала с выраженностью клинических симптомов. Повышение уровня CGRP было связано со снижением апоптоза эпителиальных клеток роговицы в животной модели ЗСГ. Молекулярный анализ выявил подавление SISGs и активацию пути IFN-γ/JAK2/STAT1 как потенциальные механизмы, связанные с CGRP и опосредующие снижение апоптоза.