Временная экспрессия полноразмерной и зрелой наттокиназы в Nicotiana benthamiana: ранний некроз при экспрессии полноразмерной формы и функциональная активность зрелого фермента

Наттокиназа — мощный фибринолитический фермент, широко применяемый при лечении сердечно-сосудистых заболеваний благодаря способности непосредственно расщеплять фибрин и субстраты плазмина, эффективно растворяя тромбы. В этом исследовании кодирующую последовательность полноразмерной и зрелой наттокиназы временно экспрессировали в Nicotiana benthamiana с помощью модифицированной системы репликона вируса жёлтой карликовости фасоли (BeYDV). Сверхэкспрессия полноразмерной (пре-про) формы приводила к выраженному некрозу листьев уже через 2,5 суток после инфильтрации; анализ утечки электролитов показал снижение целостности мембран на 83,5% к третьим суткам. Зрелую форму наттокиназы удалось экспрессировать без ранней цитотоксичности; она обладала высокой казеинолитической и фибринолитической активностью, достигавшей 22 500 FU/г, что сопоставимо с коммерческими стандартами. Результаты подтверждают возможность получения биологически активной наттокиназы в растениях и указывают на потенциал растительных систем экспрессии как масштабируемых и экономически эффективных платформ для производства ферментов с терапевтическим применением.