Снижение экспрессии ключевого циркадного гена Nr1d2 в слёзной железе способствует развитию послеоперационной болезни сухого глаза вследствие нарушения липидного обмена

Цель: Болезнь сухого глаза (БСГ) — частое осложнение после рефракционной хирургии; её механизмы изучены не полностью. Поскольку циркадный ритм тесно регулирует секрецию слёзной жидкости, целью настоящего исследования было изучить изменения циркадных ритмов в слёзной железе после рефракционной хирургии роговицы и связанные с ними механизмы.

Методы: Мышам C57BL/6 выполняли деэпителизацию роговицы и рассечение её стромы. БСГ оценивали с помощью теста с фенолротом и окрашивания флуоресцеином. С помощью секвенирования РНК выявляли дифференциально экспрессируемые гены, связанные с циркадным ритмом; результаты подтверждали методом ОТ-ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттингом. Для анализа изменений в слёзной железе выполняли иммунофлуоресцентное исследование, окрашивание по TUNEL, нецеленаправленную метаболомику, окрашивание Oil Red O и трансмиссионную электронную микроскопию. В клинической части симптомы БСГ оценивали с помощью опросника OSDI у 867 пациентов после хирургического вмешательства и 705 человек контрольной группы.

Результаты: Деэпителизация роговицы и рассечение её стромы вызывали симптомы БСГ и нарушение функции слёзной железы, включая уменьшение объёма слезы, воспаление глазной поверхности и патофизиологические изменения слёзной железы. Экспрессия Nr1d2 — ключевого гена циркадного ритма — в слёзной железе была значительно ниже, чем в контрольной группе. Активация Nr1d2 препаратом SR9011 восстанавливала функцию слёзной железы и уменьшала выраженность симптомов БСГ. Кроме того, снижение экспрессии Nr1d2 существенно нарушало липидный обмен и функцию митохондрий в слёзной железе; применение SR9011 устраняло эти изменения. В клинической части частота БСГ была значительно выше в хирургической когорте; симптомы имели суточные колебания и чаще возникали ранним утром и поздним вечером.

Выводы: Нарушение циркадных ритмов, в частности снижение экспрессии Nr1d2, способствует развитию послеоперационной БСГ. Воздействие на Nr1d2 может стать новым терапевтическим подходом для восстановления функции слёзной железы и уменьшения выраженности БСГ.