13-цис-ретиноевая кислота регулирует дифференцировку гранулёзных клеток яичника свиньи через ось «сигнальный путь ретиноевой кислоты — FoxA1»: значение для развития фолликулов и лютеинизации яичника

В этом исследовании показано, что 13-цис-ретиноевая кислота (13cRA) — производное витамина A, применяемое в клинической онкологии, — оказывает регулирующее действие на развитие фолликулов и лютеинизацию яичника, влияя на пролиферацию и дифференцировку клеток гранулёзы. В мышиной модели введение 13cRA значительно увеличивало число первичных фолликулов и жёлтых тел, что оценивали при исследовании срезов яичника и подсчёте фолликулов; это указывает на ускорение созревания фолликулов и повышение овуляторной компетентности. В культурах клеток гранулёзы яичника свиньи 13cRA стимулировала переход клеточного цикла из фазы G1 в фазу S и пролиферацию, а также повышала экспрессию маркеров дифференцировки — рецептора лютеинизирующего гормона (LHR) и рецептора прогестерона (PGR). Эксперименты с усилением и подавлением экспрессии показали ключевую роль белка 2, связывающего ретиноевую кислоту (CRABP2): сверхэкспрессия CRABP2 усиливала вызванное 13cRA повышение экспрессии LHR и PGR, тогда как подавление CRABP2 с помощью специфической малой интерферирующей РНК (siRNA) давало противоположный эффект. Сигнальный путь ретиноевой кислоты охарактеризовали также с помощью избирательного воздействия на рецепторы. 13cRA способствовала образованию гетеродимера рецепторов RARβ/RXRβ; его фармакологическая активация адапаленом усиливала экспрессию LHR и PGR, а подавление экспрессии рецепторов снижало её. Исследования регуляции метаболизма ретиноевой кислоты показали, что CRABP1 и изоформы CYP26 (CYP26A1 и CYP26B1) функционально противодействуют действию 13cRA; это было подтверждено экспериментами с подавлением экспрессии с помощью siRNA и обработкой ингибитором CYP26 R115866. Установлено также, что FoxA1, отрицательный регулятор пролиферации и дифференцировки клеток гранулёзы, опосредует влияние 13cRA на их дифференцировку; это показали в экспериментах с трансфекцией siRNA и обработкой рекомбинантным белком FoxA1. Подавление экспрессии FoxA1 под действием 13cRA происходило при участии CRABP2-зависимого переноса в ядро и активации гетеродимера RARβ/RXRβ; совместное изменение активности компонентов системы CRABP1/CYP26 (CYP26A1 и CYP26B1) существенно меняло регуляцию FoxA1. Таким образом, 13cRA подавляет экспрессию FoxA1 через молекулы сигнального пути ретиноевой кислоты (CRABP2, гетеродимер RARβ/RXRβ, CRABP1, CYP26A1 и CYP26B1) и тем самым способствует дифференцировке клеток гранулёзы яичника свиньи.