Алисол A 23,24-диацетат уменьшает острое повреждение легких, вызванное ЛПС, через сигнальный путь IL-17A/NF-κB

Цель: С помощью проверки на нескольких моделях подтвердить, что алисол A 23,24-диацетат (AAD) уменьшает острое повреждение легких (ОПЛ), вызванное ЛПС, через сигнальный путь IL-17A/NF-κB, и получить экспериментальные данные для доклинических исследований.

Методы: Мышам вводили препараты через зонд в течение 3 дней подряд, затем инстиллировали ЛПС в трахею, чтобы вызвать ОПЛ. У животных оценивали гистологические срезы легких, функцию легких, показатели оксидативного стресса и апоптоза, метаболические показатели в ткани легких и сыворотке, а также содержание иммунных клеток и воспалительных факторов. На основе базы данных GEO отобрали дифференциально экспрессируемые гены; для изучения возможных механизмов ОПЛ использовали молекулярный докинг и ПЦР. Затем на моделях ОПЛ у мышей и органоидов легких, применяя иммуноблоттинг и иммунофлуоресцентный анализ, исследовали белки, связанные с сигнальным путем IL-17A/NF-κB. Связывание AAD с белком IL-17A оценивали с помощью теста термического сдвига в клетках (CETSA). Наконец, механизм действия AAD при ОПЛ, вызванном ЛПС, проверяли на клетках Beas-2B с применением агониста IL-17 SR0987 и антагониста IL-17 бродалумаба, а также на модели данио-рерио с подавлением экспрессии гена IL-17A и его сверхэкспрессией.

Результаты: AAD значительно уменьшал повреждение легких и улучшал их функцию у мышей с ОПЛ, вызванным ЛПС, корректировал нарушения обмена веществ и иммунные нарушения, а также подавлял высвобождение воспалительных факторов. Анализ базы GEO, молекулярный докинг, ПЦР, иммуноблоттинг, иммунофлуоресцентный анализ и CETSA показали, что AAD уменьшает ОПЛ, вызванное ЛПС, через сигнальный путь IL-17A/NF-κB. В клетках Beas-2B AAD значительно подавлял вызванное ЛПС повышение уровня активных форм кислорода и апоптоза, снижал экспрессию белков IL-17A и фосфорилированного p65 NF-κB, а также уменьшал содержание воспалительных факторов; его эффект был сопоставим с действием антагониста IL-17. Однако добавление агониста IL-17 устраняло терапевтический эффект AAD. В опытах на данио-рерио AAD значительно повышал двигательную активность рыб и снижал уровни РНК IL-17A и воспалительных факторов. Сверхэкспрессия гена IL-17A устраняла терапевтический эффект AAD.

Выводы: AAD уменьшает ОПЛ, вызванное ЛПС, через сигнальный путь IL-17A/NF-κB.